在給定溫度和相對濕度條件下，保濕劑不斷從環(huán)境中吸收水分，潮解或者形成溶液。基于化妝品中不同保濕劑分子對水分子的作用力不同，吸收水分和保持水分的能力也略有差異。通過稱重法測試保濕劑的吸濕率可以表征該成分的保濕功效。

保濕劑在一定時間吸收的水分重量占該保濕劑重量的百分比，為此保濕劑在該時間內(nèi)該相對濕度下的吸濕率。一般采用飽和硝酸鉀溶液維持94%的相對濕度。將涂抹有受試物的玻璃板置于簡易恒濕器的多孔隔板上，并保證隔板上下空氣的流通，放置一段時間后（2、4、6、8h）取出、稱重，計(jì)算吸濕率。

本方法適用于吸水性保濕原料或含有該類型保濕成分的保濕產(chǎn)品的吸濕率測定。油脂類保濕劑和水劑、乳液等含水量較高的產(chǎn)品不宜采用該方法。

1.2保濕性

保水率為在某一固定相對濕度的前提下，樣品放置不同時間后（樣品放置后的質(zhì)量-樣品放置前的質(zhì)量）/樣品放置前的質(zhì)量*100%，反應(yīng)產(chǎn)品隨時間的變化所呈現(xiàn)的吸濕性的大小。

不同保濕劑分子對水分子的作用力不同，保持水分的能力也略有差異。試驗(yàn)常采用稱重法測試失水率表征保濕劑的保水能力，從而表征化妝品及其原料保持水分的能力大小。采用一定體積的飽和碳酸鉀溶液維持約43%的相對濕度。稱取一定量受試物溶液，均勻涂覆在貼有3M膠帶的玻璃板上，放置一段時間后（2、4、6、8h）稱量受試物的重量，計(jì)算失水率。失水率越大表示該保濕劑的保水性越差。失水率越小表示該保濕劑的保水性越強(qiáng)，長期保濕效果越好。

本方法適用于吸水性保濕原料或含有該類型保濕成分的保濕產(chǎn)品的失水率測定，油脂類保濕劑或含水量較低的膏霜類產(chǎn)品不宜采用該方法。

1.3吸濕穩(wěn)定性

理想的保濕劑除了能在周圍環(huán)境中吸收水分，在一般濕度下保持水分外，還需要具備其吸收的水分隨著相對濕度變化較小的特點(diǎn)。當(dāng)外界相對濕度變小時，如果保濕劑的吸收水分的能力變小將會導(dǎo)致皮膚干燥。吸濕穩(wěn)定性的測定一般稱取同質(zhì)量的某一固定保濕劑，將其放置在不同相對濕度的環(huán)境中，一段時間后比較其各自的吸濕量。如果不同環(huán)境中的吸濕量變化不大，表明該保濕劑的吸濕穩(wěn)定性好。

1.4皮脂分析

皮脂膜是由皮膚表面的皮脂與汗液和水乳化后在皮膚表面形成的乳化皮脂薄膜，覆蓋在皮膚和毛發(fā)的表面。皮脂膜像一層無形的屏障影響皮膚的健康。皮脂膜可有效滋潤皮膚，使皮膚柔韌、潤滑、富有光澤、防止干裂。另外，皮脂膜可防止皮膚水分過度蒸發(fā)、防止外界水分及其他物質(zhì)大量進(jìn)入，鎖住水分，阻止營養(yǎng)物質(zhì)、保濕因子及水分的散失，使皮膚含水量保持正常，對皮膚鎖水功能起到重要的屏障功能。

皮膚表面皮脂成分含量：甘油三酯約占20-60%、蠟脂約占23-29、角鯊烯約占10-14、游離脂肪酸約占5%-40%、膽固醇及膽固醇酯約占1-5%。皮膚表面脂質(zhì)受多種因素的影響，皮脂成分含量也是在一定范圍內(nèi)變動。通常情況下，通過分析神經(jīng)酰胺、膽固醇、脂肪酸含量及其比例，分析皮脂成分是否存在偏頗，可間接反應(yīng)皮脂膜的健康狀態(tài)。

1.5天然保濕因子

（NaturalMoisturizingFactor，NMF）

NMF是存在于角質(zhì)層內(nèi)與水結(jié)合的一些低分子量物質(zhì)的總稱，包括氨基酸、吡咯烷酮羧酸、乳酸、尿素、尿刊酸、離子碳水化合物、氨、多態(tài)、葡糖胺及其他未知物質(zhì)，是一類皮膚自身存在的、具有吸水特性的小分子復(fù)合物。與皮膚水合作用密切相關(guān)的NMF中最具代表性的為PCA、UCA、Urea，可以吸收大量的水分并保持水分不被散失。NMF作為一種低分子量水溶性的高效吸濕性分子化合物，能幫助角質(zhì)細(xì)胞吸收水分，維持水合功能。

對NMF的定量測試常見的方法為：1.利用膠帶剝脫，采用高效液相色譜、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對剝脫下的角質(zhì)層細(xì)胞中UCA、PCA等成分進(jìn)行分析，2.基于保濕的原理，從二維\三維細(xì)胞水平檢測與保濕相關(guān)基因的表達(dá)情況，利用3D皮膚模型直接檢測皮膚角質(zhì)層中PCA、UCA、Urea的含量變化，再利用相似相容原理，采用高效液相色譜對角質(zhì)層PCA、UCA、Urea進(jìn)行分離和檢測。

1.6皮膚屏障相關(guān)蛋白及其基因表達(dá)

人體正常的皮膚有兩方面的屏障功能：一方面抵御外界各種物理、化學(xué)和生物等有害物質(zhì)對皮膚的侵害，對酸、堿、有機(jī)溶劑及物理性摩擦具有一定的抵抗力；另一方面對外界物質(zhì)的吸收、內(nèi)部物質(zhì)的流失具有明顯的限制作用，可阻止體液外滲與化學(xué)物質(zhì)的內(nèi)滲，防止水分散失。皮膚屏障受損表觀上將會導(dǎo)致細(xì)胞連接松散、易脫落，細(xì)胞間緊密連接能力變?nèi)酰琴|(zhì)細(xì)胞表面TEWL升高，皮膚保水能力下降，皮膚變的敏感、脆弱。所以，皮膚屏障功能在保持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定上起著重要的作用。

皮膚屏障功能主要依靠角質(zhì)層的“磚墻結(jié)構(gòu)”。角質(zhì)層的主要成分是角蛋白和脂質(zhì)緊密有序的排列。所以，對皮膚屏障功能的檢測可以通過測定相關(guān)蛋白的表達(dá)間接反應(yīng)皮膚的水合力、保水力。與皮膚屏障直接相關(guān)的蛋白主要包含：角蛋白、絲聚合蛋白、外皮蛋白、兜甲蛋白、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、緊密連接蛋白-1等。其檢測方法主要包含：定量即時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

（QuantitativeReal-timePolymeraseChainReaction，qRT-PCR）、免疫細(xì)胞化（Immunocytochemistry，ICC）/免疫熒光（Immunofluorescence，IF）、免疫組化。

1.7水通道蛋白（Aquaporins，AQPs）

皮膚固有的水合能力不僅由于角質(zhì)細(xì)胞中NMF的存在，還依賴于皮膚內(nèi)水分的運(yùn)輸。AQPs是一類膜蛋白家族，可選擇性地轉(zhuǎn)運(yùn)水和小分子溶質(zhì)（如甘油）。

在人體皮膚中，AQP-3是AQPs家族表達(dá)最豐富的水通道蛋白亞型。其在表皮的表達(dá)量具有空間層次，主要表達(dá)于人表皮基底層，棘層、顆粒層，到角質(zhì)層逐漸消失。AQP-3在基底膜帶的高表達(dá)，可以促使水，甘油及尿素的轉(zhuǎn)運(yùn)，擔(dān)負(fù)著角質(zhì)層甘油運(yùn)輸?shù)闹匾饔谩QP-3將內(nèi)源性的甘油以及皮脂腺中的甘油三酯運(yùn)輸進(jìn)入表皮，使其直接或間接影響皮膚保濕功效。

通過抗原抗體的特異性結(jié)合，可以用熒光基團(tuán)標(biāo)記出表皮細(xì)胞表達(dá)的AQP3，熒光強(qiáng)度即對應(yīng)了該蛋白的表達(dá)量，同時，通過定量即時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測定其mRNA的表達(dá)，從而可以一定程度上反映出皮膚轉(zhuǎn)運(yùn)水分的能力。